کیت استخراج RNA از خون

کیت استخراج RNA از خون پارس توس (Blood RNA Extraction Kit): جداسازی سریع و کارآمد RNA از نمونه‌های خون

استخراج RNA با کیفیت بالا و خالص از نمونه‌های خون، گام آغازین و بسیار مهم در بسیاری از مطالعات پزشکی، تشخیص بیماری‌ها، تحقیقات بیولوژیکی و آزمایش‌های ژنتیکی است. RNA، به ویژه mRNA، اطلاعات حیاتی در مورد بیان ژن‌ها و وضعیت فیزیولوژیکی یا بیماری‌زایی سلول‌ها ارائه می‌دهد. با توجه به وجود آنزیم‌های ریبونوکلئاز (RNase) فراوان در خون و سایر چالش‌ها مانند مهارکننده‌ها، نیاز به یک روش استخراج قابل اعتماد و کارآمد ضروری است. "کیت استخراج RNA از خون پارس توس" (Blood RNA Extraction Kit) یک راه حل بهینه برای جداسازی سریع و آسان Total RNA از خون کامل یا بافی‌کوت (Buffy Coat) انسانی را ارائه می‌دهد. این کیت بر پایه روش ستون سیلیکا طراحی شده و به گونه‌ای فرموله گردیده تا RNA با کیفیت و با کمترین میزان آلودگی را فراهم کند.

مکانیسم عمل و فناوری کیت استخراج RNA از خون پارس توس

این کیت با بهره‌گیری از اصول شیمیایی و فیزیکی پیشرفته، به طور موثر RNA را از سایر اجزای خون جدا می‌کند. مراحل اصلی فرآیند استخراج به شرح زیر است:

1. لیز سلولی و غیرفعال کردن RNase:

   • RL (Lysis Buffer): بافر لیز (RL) اولین خط دفاعی است. این بافر حاوی دترجنت‌های قوی است که به سرعت گلبول‌های قرمز و سفید را لیز کرده و RNA را آزاد می‌کنند. مهم‌تر از آن، این بافر حاوی عوامل کائوتروپیک (Chaotropic Agents) قدرتمندی است که به سرعت آنزیم‌های RNase (ریبونوکلئازها) را دناتوره و غیرفعال می‌کنند. غیرفعال‌سازی فوری RNase برای محافظت از RNA بسیار شکننده حیاتی است.

   • RNA Carrier: این جزء به افزایش بازده RNA، به ویژه در نمونه‌هایی با غلظت RNA کم، کمک می‌کند. این حامل به عنوان یک ماده کمک‌رسوب‌دهنده عمل کرده و به RNA در اتصال به غشای ستون کمک می‌کند.

2. حذف پروتئین‌ها و آلاینده‌ها:

   • پس از لیز، نمونه با کلروفرم (که باید توسط کاربر فراهم شود) ترکیب می‌شود. کلروفرم به جداسازی فازهای آلی و آبی کمک کرده و به طور موثری پروتئین‌ها و لیپیدهای سلولی را در فاز آلی به دام می‌اندازد و از RNA جدا می‌کند.

   • اتانول 96%: افزودن اتانول 96% (که باید توسط کاربر فراهم شود) به فاز آبی پس از حذف پروتئین، شرایط بهینه برای اتصال RNA به غشای ستون سیلیکا را فراهم می‌کند.

3. اتصال انتخابی RNA به ستون (RNA Binding to Column):

   • Spin Columns (purple rings): مخلوط آماده شده روی یک ستون چرخان (Spin Column) که حاوی یک غشای سیلیکا با ظرفیت بالا است، بارگذاری می‌شود. در حضور غلظت بالای نمک و اتانول، RNA به طور انتخابی و محکم به غشای سیلیکا متصل می‌شود. سایر آلاینده‌ها و پروتئین‌های باقی‌مانده از ستون عبور می‌کنند.

4. شستشو (Washing):

   • PW (Wash Buffer): ستون با استفاده از بافر شستشو (PW) که از قبل با اتانول 70% ترکیب شده است، شسته می‌شود. این مرحله برای حذف کامل نمک‌ها، پروتئین‌های باقی‌مانده، و سایر مهارکننده‌ها از RNA متصل شده به غشا ضروری است. شستشوی کامل و سانتریفیوژ برای خشک کردن غشا، به اطمینان از خلوص نهایی RNA کمک می‌کند.

5. جدا کردن و بازیابی RNA خالص (Elution):

   • RNase-free DEPC Water: در نهایت، RNA خالص شده با استفاده از آب عاری از RNase (DEPC Treated Water) از غشای سیلیکا جدا شده و در محلول معلق می‌شود. این بافر به حفظ یکپارچگی و پایداری RNA برای ذخیره‌سازی طولانی‌مدت کمک می‌کند.

اجزای کامل کیت استخراج RNA از خون پارس توس (50 تستی):

• RL (Lysis Buffer): بافر اصلی برای لیز سلول‌ها و غیرفعال کردن RNase.

• RNA Carrier: حامل RNA برای افزایش بازده استخراج.

• PW (Wash Buffer): بافر شستشو (نیاز به افزودن اتانول 70% و 96%).

• RNase-free DEPC Water: آب عاری از RNase برای جدا کردن RNA.

• Spin Columns (purple rings): ستون‌های اصلی حاوی غشای سیلیکا برای اتصال RNA.

• Collection tubes: لوله‌های جمع‌آوری برای سانتریفیوژ و جمع‌آوری RNA.

ویژگی‌ها و مزایای برجسته کیت استخراج RNA از خون:

• جداسازی سریع و آسان: کیت بر پایه "روش ستون سیلیکا" طراحی شده است که فرآیند استخراج RNA را به طور چشمگیری ساده و سریع می‌کند و در "زمان کوتاهی" RNA با کیفیت بالا را فراهم می‌آورد.

• مناسب برای خون کامل و بافی‌کوت: کیت برای جداسازی RNA از "200 میکرولیتر نمونه خون کامل تازه یا منجمد انسانی یا بافی‌کوت" مناسب است. استفاده از بافی‌کوت می‌تواند "جهت استخراج RNA بیشتر" مفید باشد، زیرا غنی از گلبول‌های سفید است.

• RNA با کیفیت بالا و کمترین میزان آلودگی: RNA استخراج شده توسط این کیت دارای "کیفیت و عملکرد عالی" است و "با کمترین میزان آلودگی در مقایسه با سایر کیت‌ها" همراه است. این شامل حذف موثر DNA ژنومی، پروتئین‌ها، هموگلوبین و سایر مهارکننده‌های رایج در نمونه‌های خون است.

• حفاظت عالی از RNA: حضور بافر لیز قدرتمند و RNase-free DEPC Water به حفظ یکپارچگی RNA و جلوگیری از تخریب آن توسط RNaseها کمک می‌کند.

• کاربردپذیری گسترده: RNA خالص شده برای طیف وسیعی از کاربردهای پایین‌دستی حساس مانند Real-Time RT-PCR (RT-qPCR)، ساخت کتابخانه‌های cDNA، آنالیز بیان ژن، Northern blotting و RNA-Seq مناسب است.

• بسته‌بندی 50 تستی: این بسته‌بندی برای آزمایشگاه‌هایی با حجم بالای نمونه‌گیری مناسب و مقرون به صرفه است.

نکات مهم قبل از شروع کار و نگهداری:

• فراهم کردن مواد جانبی: "قبل از استفاده از کیت، دو ماده Chloroform و Ethanol 96% فراهم گردد." این مواد از اجزای کیت نیستند و باید توسط کاربر تهیه شوند.

• شرایط نگهداری: "این محصول باید در یخچال نگهداری شود." نگهداری در یخچال (معمولاً 4 درجه سانتی‌گراد) برای حفظ پایداری RNA و اجزای بافر حیاتی است.

نتیجه‌گیری

"کیت استخراج RNA از خون پارس توس" (Blood RNA Extraction Kit) یک راه حل جامع، قابل اعتماد و کارآمد برای جداسازی RNA با کیفیت بالا از نمونه‌های خون است. با پروتکل ساده و سریع مبتنی بر ستون، و طراحی ویژه برای غلبه بر چالش‌های مربوط به RNaseها و آلاینده‌های خون، این کیت به محققان و متخصصان بالینی امکان می‌دهد تا به سرعت و با اطمینان، RNA لازم برای طیف وسیعی از مطالعات ژنتیکی، تشخیصی و بیولوژیکی را به دست آورند. این محصول یک ابزار ضروری در هر آزمایشگاه پزشکی، تحقیقاتی و تشخیص مولکولی محسوب می‌شود که به دنبال نتایج دقیق و قابل تکرار در آنالیز RNA هستند.