کیت استخراج DNA ژنومی از خون

کیت استخراج DNA ژنومی از خون پارس توس (Blood Genomic DNA Extraction Kit): راه حل سریع و کارآمد برای DNA با کیفیت از نمونه‌های خونی

استخراج DNA ژنومی با کیفیت بالا و خالص از نمونه‌های خون، یک گام اساسی و حیاتی در طیف وسیعی از تحقیقات و کاربردهای تشخیصی در پزشکی، ژنتیک، پزشکی قانونی و بیولوژی مولکولی است. DNA استخراج شده به عنوان ماده اولیه برای PCR، Real-Time PCR (qPCR)، تعیین توالی (Sequencing)، مطالعات پلی‌مورفیسم تک‌نوکلئوتیدی (SNP analysis)، و تشخیص بیماری‌ها عمل می‌کند. "کیت استخراج DNA ژنومی از خون پارس توس" (Blood Genomic DNA Extraction Kit) یک راه‌حل بهینه، سریع و قابل اعتماد را برای خالص‌سازی DNA ژنومی از خون کامل، سرم و پلاسما (انسانی و حیوانی) ارائه می‌دهد. این کیت بر پایه روش ستونی (Spin Column-based method) و غشای سیلیکا طراحی شده تا DNA با خلوص و یکپارچگی عالی را در کوتاه‌ترین زمان ممکن فراهم آورد.

مکانیسم عمل و فناوری کیت استخراج DNA ژنومی از خون پارس توس

این کیت با بهره‌گیری از اصول شیمیایی و فیزیکی پیشرفته، به طور موثر DNA را از سایر اجزای خون جدا می‌کند. مراحل اصلی فرآیند استخراج به شرح زیر است:

1. لیز سلولی و محافظت از DNA:

   • Proteinase K: این کیت شامل پروتئیناز K (که به صورت پودر لیوفیلیزه ارائه شده و باید با PK Solution حل شود) است. پروتئیناز K یک آنزیم پروتئولیتیک قوی است که پروتئین‌ها (از جمله نوکلئازهایی که می‌توانند DNA را تخریب کنند) را به طور کامل تجزیه می‌کند. این مرحله باعث آزاد شدن DNA از ساختارهای سلولی و محافظت از آن در برابر تخریب می‌شود. (نکته: پروتئیناز K به عنوان یک بخش فریزری از کیت ارائه می‌شود و باید در 20- درجه سانتی‌گراد نگهداری شود.)

   • PB (Binding Buffer): این بافر لیز (در واقع، یک بافر اتصال-لیز) به سرعت سلول‌های خونی را لیز کرده و همزمان محیط مناسبی را برای اتصال DNA به غشای سیلیکا فراهم می‌کند. حاوی نمک‌های کائوتروپیک است که به دناتوره کردن پروتئین‌ها و غیرفعال کردن آنزیم‌های مزاحم کمک می‌کنند.

2. اتصال انتخابی DNA به ستون (DNA Binding to Column):

   • پس از لیز، مخلوط آماده شده (با افزودن اتانول مطلق که باید توسط کاربر فراهم شود) روی یک ستون چرخان (Spin Column) حاوی یک غشای سیلیکا بارگذاری می‌شود. در حضور غلظت بالای نمک و اتانول، DNA به طور انتخابی و محکم به غشای سیلیکا متصل می‌شود. در حالی که پروتئین‌ها، لیپیدها، هموگلوبین و سایر آلاینده‌ها از ستون عبور می‌کنند.

3. شستشو (Washing):

   • PW1 (Wash Buffer) و PW2 (Wash Buffer): ستون با استفاده از بافرهای شستشو (PW1 و PW2) شسته می‌شود. این مراحل برای حذف کامل نمک‌ها، پروتئین‌های باقی‌مانده و سایر مهارکننده‌ها از DNA متصل شده به غشا ضروری است. شستشوی کامل و خشک کردن غشا (با سانتریفیوژ) به اطمینان از خلوص نهایی DNA کمک می‌کند. (نکته مهم: قبل از شروع کار، کاربران باید اتانول مطلق (Absolute Ethanol) را به بافرهای شستشو (که به صورت غلیظ در کیت ارائه شده‌اند) اضافه کنند.)

4. جدا کردن و بازیابی DNA خالص (Elution):

   • PE (Elution Buffer): در نهایت، DNA خالص شده با استفاده از یک بافر جداسازی (PE) که معمولاً یک بافر با pH قلیایی ملایم (مانند TE Buffer یا آب عاری از نوکلئاز) است، از غشای سیلیکا جدا شده و در محلول معلق می‌شود. این بافر به حفظ پایداری و یکپارچگی DNA برای ذخیره‌سازی طولانی‌مدت کمک می‌کند.

اجزای کامل کیت استخراج DNA ژنومی از خون پارس توس (50 تستی):

• PB (Binding Buffer): بافر اصلی برای لیز سلولی و اتصال DNA به ستون.

• PW1 (Wash Buffer): بافر شستشوی اولیه (نیاز به افزودن اتانول مطلق).

• PW2 (Wash Buffer): بافر شستشوی ثانویه و نهایی (نیاز به افزودن اتانول مطلق).

• PE (Elution Buffer): بافر برای جداسازی DNA خالص.

• Lyophilized Proteinase K + PK Solution: پودر لیوفیلیزه پروتئیناز K به همراه محلول حلال آن.

• Spin columns: ستون‌های اصلی حاوی غشای سیلیکا برای اتصال DNA.

• Collection tubes: لوله‌های جمع‌آوری برای سانتریفیوژ و جمع‌آوری DNA.

ویژگی‌ها و مزایای برجسته کیت استخراج DNA ژنومی از خون:

• پروتکل آسان و سریع: این کیت "طبق یک پروتکل آسان" و "بدون مرحله رسوب‌زایی" عمل می‌کند. "زمان آماده‌سازی برای یک نمونه کمتر از 30 دقیقه است." این سرعت، کارایی آزمایشگاه را به شدت افزایش می‌دهد.

• DNA خالص با کیفیت بالا: DNA استخراجی "علاوه بر کیفیت بالا، عاری از هر گونه مواد و ترشحات آلی یا رسوبات الکلی می‌باشد." این تضمین‌کننده خلوص بالا برای کاربردهای حساس است.

• سازگاری کامل با برنامه‌های پایین دستی: "DNA خالص با تمام آنزیم‌های محدود کننده (Restriction Enzymes) تست شده و با برنامه‌های پایین دستی کاملاً سازگار است." این شامل PCR، Real-Time PCR، تعیین توالی، کلونینگ و سایر آنالیزهای ژنتیکی می‌شود.

• گستردگی کاربرد در نمونه‌های خونی: این کیت برای استخراج DNA ژنومی از "حداکثر 200 میکرولیتر نمونه خون کامل تازه یا منجمد انسان یا حیوان، سرم و پلاسما" مناسب است.

• بازدهی مناسب DNA: "میزان عملکرد این کیت بسته به تعداد گلبول‌های سفید نمونه، بازدهی بین 4 تا 10 میکروگرم DNA دارد." این بازدهی برای اکثر کاربردها کافی است.

• حذف مرحله رسوب‌زایی: عدم وجود مرحله رسوب‌زایی، فرآیند را ساده‌تر، سریع‌تر و با خطای کمتری همراه می‌سازد.

• بسته‌بندی 50 تستی: این بسته‌بندی برای آزمایشگاه‌هایی با حجم بالای نمونه‌گیری مناسب و مقرون به صرفه است.

نکات مهم قبل از شروع کار و نگهداری:

• فراهم کردن اتانول مطلق: "قبل از شروع کار با کیت لطفا اتانول مطلق (Absolute Ethanol) فراهم گردد." این ماده از اجزای کیت نیست و باید توسط کاربر تهیه شود.

• شرایط نگهداری: این محصول دارای یک بخش فریزری (Proteinase K) است که باید در فریزر 20- درجه سانتی‌گراد نگهداری شود. سایر اجزا (بافرها، ستون‌ها و لوله‌ها) باید در دمای اتاق نگهداری شوند.

نتیجه‌گیری

"کیت استخراج DNA ژنومی از خون پارس توس" (Blood Genomic DNA Extraction Kit) یک راه‌حل جامع، قابل اعتماد و کارآمد برای جداسازی DNA ژنومی با کیفیت بالا از انواع نمونه‌های خونی است. با پروتکل سریع و ساده مبتنی بر ستون، و طراحی ویژه برای تولید DNA خالص و عاری از مهارکننده‌ها، این کیت به محققان و متخصصان بالینی امکان می‌دهد تا به سرعت و با اطمینان، DNA لازم برای طیف وسیعی از مطالعات ژنتیکی و تشخیصی را به دست آورند. این محصول یک ابزار ضروری در هر آزمایشگاه پزشکی، تحقیقاتی و تشخیص مولکولی محسوب می‌شود که به دنبال نتایج دقیق و قابل تکرار در آنالیز DNA هستند.