خلاصه توضیحات:
محیط کشت کلیگر آیرون آگار KIA از برند کیولب یک محیط کشت افتراقی است که برای بررسی خصوصیات بیوشیمیایی برخی باکتریهای گرم منفی، بهویژه اعضای انتروباکتریاسه، به کار میرود. این محیط حاوی دو قند (گلوکز و لاکتوز، با مقدار گلوکز کمتر)، نشانگر pH فنل رد و سولفات آهن برای تشخیص تولید H2S است. کاربردها شامل تشخیص تخمیر گلوکز و لاکتوز، تولید گاز و تولید هیدروژن سولفید است. مدت زمان انکوباسیون معمولاً 18-24 ساعت در 35 درجه سانتیگراد گزارش شده است.
محیط کشت کلیگر آیرون آگار
محیط کشت کلیگر آیرون آگار (KIA)
کلیگر آیرون آگار یا KIA (Kligler's Iron Agar) یک محیط کشت افتراقی است که برای شناسایی برخی از ویژگیهای بیوشیمیایی باکتریهای گرم منفی، به ویژه اعضای خانواده انتروباکتریاسه، استفاده میشود. این محیط به ما کمک میکند تا توانایی باکتری در تخمیر قندهای گلوکز و لاکتوز و همچنین تولید گاز هیدروژن سولفید را بررسی کنیم.
ترکیبات و اصول کار:
-
قندها: این محیط حاوی دو نوع قند، گلوکز و لاکتوز، است. مقدار گلوکز کمتر از لاکتوز است. این تفاوت در غلظت به این دلیل است که ابتدا باکتریها گلوکز را تخمیر میکنند و اگر قادر به تخمیر لاکتوز باشند، پس از مصرف تمام گلوکز به سراغ لاکتوز میروند.
-
نشانگر pH: فنل رد به عنوان نشانگر pH در این محیط استفاده میشود. در محیط اسیدی (پس از تخمیر قندها) رنگ محیط به زرد تغییر میکند و در محیط قلیایی (هنگامی که باکتریها آمینو اسیدها را تجزیه میکنند) رنگ محیط به قرمز تغییر میکند.
-
سولفات آهن: برای تشخیص تولید گاز هیدروژن سولفید استفاده میشود. اگر باکتری هیدروژن سولفید تولید کند، با سولفات آهن واکنش داده و رسوبی به رنگ سیاه ایجاد میکند.
کاربردها:
-
تخمیر قندها: با مشاهده تغییر رنگ محیط از قرمز به زرد در قسمت شیبدار یا عمقی لوله، میتوان به توانایی باکتری در تخمیر گلوکز و لاکتوز پی برد.
-
تولید گاز: ایجاد حباب یا شکاف در محیط نشاندهنده تولید گاز توسط باکتری است.
-
تولید هیدروژن سولفید: ایجاد رسوب سیاه در محیط نشاندهنده تولید گاز هیدروژن سولفید توسط باکتری است.
تفسیر نتایج:
|
ویژگی |
نتیجه مثبت |
نتیجه منفی |
|---|---|---|
|
تخمیر گلوکز |
زرد شدن قسمت عمقی لوله |
قرمز ماندن قسمت عمقی لوله |
|
تخمیر لاکتوز |
زرد شدن کل لوله (شیبدار و عمقی) |
قرمز ماندن کل لوله یا زرد شدن فقط قسمت عمقی |
|
تولید گاز |
ایجاد حباب یا ترک در محیط |
عدم وجود حباب یا ترک |
|
تولید هیدروژن سولفید |
ایجاد رسوب سیاه |
عدم وجود رسوب سیاه |
نکات مهم:
-
انکوباسیون: معمولاً در دمای 35 درجه سانتیگراد به مدت 18-24 ساعت انکوبه میشود.
-
تفسیر نتایج: تفسیر نتایج باید با دقت انجام شود و همراه با سایر آزمایشات بیوشیمیایی باشد تا شناسایی دقیق باکتری صورت گیرد.
-
کنترل کیفیت: همیشه از یک کنترل مثبت و یک کنترل منفی استفاده کنید.
محدودیتها:
-
عدم اختصاصیت کامل: برخی باکتریها ممکن است نتایج متفاوتی در این محیط نشان دهند.
-
تأثیر عوامل محیطی: عوامل محیطی مانند pH اولیه محیط و دمای انکوباسیون میتوانند بر نتایج تأثیر بگذارند.
در کل، محیط کشت کلیگر آیرون آگار یک ابزار ارزشمند در آزمایشگاههای میکروبیولوژی برای شناسایی اولیه باکتریهای گرم منفی است.
سوالات متداول
پاسخ سوالات پرتکرار را اینجا ببینید
چگونه نتایج روی محیط کشت کلیگر آیرون آگار تفسیر میشود؟
با تغییر رنگ در قسمتهای شیبدار و عمقی و مشاهده حباب یا رسوب میتوان تواناییها را تشخیص داد: زرد شدن نشاندهنده تخمیر قندهاست، ایجاد حباب یا ترک نشاندهنده تولید گاز است و ایجاد رسوب سیاه نشاندهنده تولید هیدروژن سولفید است.
آیا این محیط تولید هیدروژن سولفید را نشان میدهد؟
بله. اگر رسوب سیاه در محیط تشکیل شود، نشاندهنده تولید هیدروژن سولفید توسط باکتری است؛ در غیر این صورت رسوب سیاه مشاهده نخواهد شد.
شرایط انکوباسیون برای این محیط چیست؟
معمولاً انکوباسیون در 35 درجه سانتیگراد به مدت 18 تا 24 ساعت انجام میشود.
آدرس ایمیل شما منتشر نخواهد شد. فیلدهای الزامی علامت گذاری شده اند *
